Humoral response and evolution of Echinococcus infection in experimentally infected sheep / Resposta humoral e evolução à infecção por Echinococcus em ovinos experimentalmente infectados

There is little information on the humoral response of sheep experimentally infected with Echinococcus granulosus. Thus, the objective of this study was to evaluate this response and measure its evolution. Doses of 10, 100, 1000 and 10000 E. granulosus eggs were prepared and inoculated via intraruminal puncture. Blood samples were obtained before inoculation and every 48 h after inoculation, until they became seropositive. Thereafter, they were taken monthly for the first year and then every three months until 1700 days of observation had been completed. An ELISA test, with total hydatid fluid antigen, was used for immunodiagnosis. The average optical density of the 12 inoculated sheep was found to be above the mean cutoff value 10 days after inoculation, went on increasing until 180 days after inoculation and remained above the cutoff level until the end of the observation period. This confirms that the antibody response of sheep to E. granulosus infection occurs before production of hydatid fluid and that activation, mobilization and establishment of oncospheres in the tissues generates a persistent response from the host's immune system.

Existe pouca informação sobre a resposta imune humoral de ovinos experimentalmente infectados por Echinococcus granulosus. O objetivo deste estudo é avaliar a resposta imune por anticorpos em ovinos infectados. Os ovinos receberam doses de 10, 100, 1.000 e 10.000 ovos de E. granulosus por via intrarruminal. Amostras de sangue foram colhidas antes e após infecção, a cada 48 horas, até a detecção de anticorpos anti-E. granulosus e após, colheram-se amostras mensal e trimestralmente, no primeiro ano até 1.700 dias de infecção. No imunodiagnóstico, utilizou-se o ensaio imunoenzimático indireto (ELISA-teste) e como antígeno total, líquido hidático. Na detecção de anticorpos anti-E. granulosus no soro das 12 ovelhas, a densidade ótica esteve acima do ponto de corte, após 10 dias de infecção, aumentando até 180 dias pós-infecção, e permanecendo acima desses dias até o final do experimento. Isso confirma que a resposta por anticorpos em ovinos infectados por E. granulosus antecede a produção de líquido hidático, e que a ativação, mobilidade e permanência das oncosferas nos tecidos possibilita a resposta imune dos hospedeiros.

Fisiopatología y respuesta inmune de ovinos experimentalmente infectados con Echinococcus granulosus / Pathophysiology and immune response in sheep experimentally infected with Echinococcus granulosus

La respuesta inmune a la infección por Echinococcus granulosus en el ovino ha sido poco estudiada. El objetivo del presente trabajo fue aportar información sobre la fisiopatología y la respuesta inmune a la infección experimental con E. granulosus en ovinos. Se inocularon experimentalmente ovinos con tres dosis distintas de huevos de E. granulosus, evaluándose la repuesta inmune por seguimiento mediante enzimo inmuno ensayo con tres preparaciones antigénicas (líquido hidatídico total, fracción purificada de líquido hidatídico total y fracción lipoproteica purificada) durante 500 días. Se sacrificaron animales en forma escalonada para observar macroscópica y microscópicamente el desarrollo del parásito. La respuesta inmune se detectó a partir de los 10 días y se mantuvo durante el período de observación, resultando inicialmente proporcional a la carga de huevos inoculados, y disminuyendo las diferencias con el tiempo. Se identificaron quistes fértiles a los 10 meses post inoculación y oncósferas vivas 500 días post inoculación. La respuesta de anticuerpos en el ovino a la infección por E. granulosus fue anterior a la formación de líquido hidatídico y resultó generada por la movilidad de la oncósfera. La temprana fertilidad identificada histológicamente indica que la alimentación de canes con vísceras de ovinos jóvenes puede producir ciclos de infección. La presencia de oncósferas vivas en el hígado, por su parte, aporta información sobre la patogenia de la enfermedad y permite expresar hipótesis sobre las causas de nuevas operaciones en el hombre luego de la extirpación de un quiste hidatídico lo que podría liberar el freno inmunitario sobre dichas oncósferas.

The immune response to Echinococcus granulosus in sheep has not been extensively investigated. The objective of this study was to increase the information on the physiopathology of E. granulosus and the immune response elicited in sheep. Animals were experimentally inoculated with three different doses of E. granulosus eggs and the immune response was evaluated over 500 days using enzyme immunoassay with three antigenic preparations: total hydatid fluid, purified fraction of hydatid fluid and purified lipoprotein fraction. Sheep were slaughtered at different intervals to observe the macroscopic and microscopic development of the parasite. Immune response was detected at 10 days and was maintained throughout the observation period, being initially proportional to the load of inoculated eggs and then decreasing over time. Fertile cysts were identified 10 months after inoculation and live onchosphere 500 days after inoculation. Antibody response to E. granulosus in sheep preceded hydatid fluid formation and was generated by the mobility of the onchosphere. Early histological identification of fertile cysts indicates that feeding dogs with viscera of young sheep can produce cycles of infection. Furthermore, the presence of live onchosphere in the liver here found contributes to a better knowledge of the pathogenesis of this disease it could be hypothetically considered as a cause for the repeated surgeries necessary in man after the extirpation of a hydatid cyst.

El diagnóstico serológico de la hidatidosis humana con ELISA y hemaglutinación indirecta / Serologic diagnosis of human hydatidosis

El diagnóstico serológico de la hidatidosis humana es fundamental ya que su detección temprana posibilita el éxito de la quimioterapia. El objetivo de este trabajo fue demostrar la validez del ELISA y la importancia de su asociación con la determinación del antígeno circulante. Se estudiaron 870 muestras por los métodos: HAI y ELISA para dosaje de anticuerpos (EAc) y antígeno circulante mediante un ELISA de captura (EAg). De los 870 sujetos estudiados 144 tenían hidatidosis. De los 144 sujetos con hidatidosis, veintiséis correspondían a sujetos operados en el período 1990-1993 observándose una buena correspondencia entre los resultados obtenidos por la HAI y el EAc. El resto (118) corresponden a sujetos con diagnóstico prequirúrgico por imágenes y sus resultados muestran que el EAc permitió detectar mayor número de portadores de quistes pulmonares (veintitrés) que la HAI (catorce), significando una mayor sensibilidad diagnóstica (Chi cuadrado: 9,8). La sensibilidad de estos métodos fue de 83 por ciento para la HAI y 91 por ciento para el EAc. Fueron detectados cuatro falsos negativos por EAc mediante el EAg lográndose as161 una sensibilidad del 95 por ciento al asociar ambos métodos. También mediante el EAg se logró detectar recidivas y no se observó influencia del tamaño de los quistes en la reactividad

Estandarización de una técnica de enzimoinmunoensayo para el diagnóstico de la hidatidosis humana / Standardization of enzimoimmunoassay for human hydatidosis

Una de las actividades que realizan los programas de control de hidatidosis causada por Echinococcus granulosus es la búsqueda de portadores asintomáticos de quistes hidatídicos en la población general, que habita en las zonas de riesgo. Se propone un método inmunoenzimático sensibilizando las placas con antígeno de líquido hidatídico total (EIE-ALHT), siguiendo la técnica descrita en el trabajo. El "valor de corte" del EIE-ALHT para posibles portadores de quistes hidatídicos fue una densidad óptica mayor que X + 4 DS, donde el número de desviaciones estándares fue denominado i (i = 4). Se comparó EIE-ALHT con HAI y DD5. La Sensibilidad fue 94 por ciento vs. 88 por ciento y 44 por ciento; la Especificidad, 100 por ciento vs. 95 por ciento y 100 por ciento; el Valor Predictivo de un Resultado Negativo, 99 por ciento vs. 98 por ciento y 31 por ciento; la Eficiencia 99 por ciento vs. 94 por ciento y 55 por ciento, respectivamente. No se obtuvieron resultados reactivos en pruebas cruzadas con cisticercosis, sífilis, tuberculosis, artritis, reumatoidea y lupus eritematoso. El método resultó de bajo costo, práctico y sencillo y adaptable para estudios de detección de la hidatidosis en población general